Funkcjonalna ekspresja zmutowanego nabłonka pseudohypoaldosteronizmu typu I na kanale Na + pozbawionym regionu tworzącego pory jego podjednostka ad 7

Ten upośledzony przemyt lub szybsze pobieranie skutkuje opóźnionym pojawieniem się i zmniejszoną liczbą kanałów na powierzchni komórki (proporcjonalnie do spadku wrażliwego na amiloryd prądu makroskopowego). Mechanizmy działania ENaC na błonę plazmatyczną nie są znane. W oocytach,. podjednostka może dotrzeć do błony komórkowej samodzielnie, jak również w kompleksach zawierających. ( i ), ale w mniejszym stopniu w porównaniu z kompleksami zawierającymi wszystkie 3 podjednostki (.) (4). Znaczenie . celowanie kompleksów ENaC w powierzchnię komórek jest uwidocznione przez kinetykę prądów makroskopowych badanych w okresie po wtrysku. Porównanie kinetyki podjednostki poddane monoterapii pojedynczo lub poddane koincydencji przy skróconym. L535stop lub pełnej długości. ENaC wykazały szybki i skuteczny handel dzikim. ENaC, krótkie opóźnienie i zmniejszenie liczby kanałów docierających do powierzchni z obciętym. L535stop, a długie opóźnienie i zmniejszona liczba kanałów, gdy nie. podjednostka była obecna. Sugeruje to, że sygnały przemytnicze są zawarte w. podjednostka w co najmniej 2 pozycjach, przed i po aminokwasie 535. W poprzednim badaniu (20), domena bogata w prolinę w wewnątrzkomórkowej COOH-końcowej części. podjednostkę zidentyfikowano jako oddziałującą z domeną SH3 (3-spektyny, która jest składnikiem cytoszkieletu. Ta bogata w prolinę domena może być ukierunkowana na kompleks ENaC typu dzikiego na szczytową powierzchnię komórki. Jego delecja w mutacji. L535stop może wyjaśniać zakłócony handel. W związku z tym proponujemy, aby pierwsze 535 pozostałości. ENaC zawierały wystarczającą ilość informacji na temat sortowania, aby umożliwić handel. podjednostki do powierzchni komórki, ale z wolniejszym przebiegiem czasu. Zmniejszenie liczby kanałów na powierzchni komórki wystarczy, aby uwzględnić zaobserwowane zmniejszenie INa +. Zatem zmutowany. L535stop koeksprymowany. i . w oocycie Xenopus powstają funkcjonalne kanały o przewodnictwie Na + zbliżonym do ENaC typu dzikiego. Rodzi to intrygujące pytanie o strukturę porów. L535stop. kanały. Szczur. L535stop. kanał wykazuje 27-krotnie obniżoną wrażliwość na amiloryd i utratę selektywności Li + nad Na +. Godne uwagi jest to, że całkowita delecja domen pre-M2 i M2. podjednostka (L535stop) powoduje zmiany właściwości kanału prawie identyczne z obserwowanymi poprzednio z mutacjami punktowymi ((S583C) (8) lub konstruktami chimerycznymi (21). Rat. L535stop kanały mają te same charakterystyki makroskopowe (odporność na amiloryd i Li + utrata selektywności) jako. kanały, z wyjątkiem 2 stosunkowo niewielkich różnic ilościowych (wrażliwość na amiloryd i selektywność K +). Ogólnie rzecz biorąc, podobieństwo między prądami uzyskanymi z. L535stop. i kanały są uderzające. Chcielibyśmy zaproponować model, w którym por jest wytwarzany przez domeny pre-M2 i M2 od tylko podjednostki. Funkcjonalna rola. L535stop. kanały w fenotypie PHA-I. Zakłócenie. podjednostka daje 2 różne fenotypy, w zależności od tego, czy zakłócenie dotyczy ludzi (pacjentów z PHA-I), czy myszy (eksperyment nokautowy). W myszach, . Młode knockout umierają w ciągu 40 godzin po urodzeniu, głównie z powodu niemożności oczyszczenia płuc z płynu (9). Na tych zwierzętach nie można odnotować pozostałej aktywności ENaC. Ten fenotyp płucny może zostać uratowany przez niski poziom aktywności ENaC w płucu myszy (<20%), jak ostatnio opisano w przypadku zakłócenia. (11) i. (10) podjednostki i dla. nokautowa mysz uratowana przez szczura transgenicznego. podjednostka (22). Tak więc, niski poziom aktywności ENaC wydaje się wystarczający in vivo do uratowania fenotypu płuc. U ludzi nie opisano noworodkowego fenotypu płuc u pacjentów z PHA-I, ale kliniczne dowody na lekkie objawy płucne wynikają z dokładnego badania młodych pacjentów (23-25). U tych pacjentów występują wczesne zdarzenia oddechowe, takie jak świszczący oddech lub nawracające infekcje wirusowe, aw jednym przypadku nawracające infekcje Pseudomonas (26). Nasze dane sugerują, że aktywność kanału mierzona in vitro może być wystarczająca in vivo do wyjaśnienia braku objawów płucnych u noworodków u pacjentów z PHA-I cierpiących na mutację. R508stop. W przypadku poważniejszych obcinania objaśnienie to może nie być wystarczające. Krótsze obcięcie opisane w pokrewnym PHA-I,