Funkcjonalna ekspresja zmutowanego nabłonka pseudohypoaldosteronizmu typu I na kanale Na + pozbawionym regionu tworzącego pory jego podjednostka ad 6

Stosując przeciwciało anty-szczurze. ENaC, byliśmy w stanie wydajnie immunoprecypitować zarówno podjednostki szczurze jak i ludzkie. ENaC. Ten eksperyment wykazał wydajną translację obu zmutowanych białek. Co ważne, nie wykryto dowodów znaczącego odczytu transkrypcyjnego kodonu stop (rysunek 5a). Read more „Funkcjonalna ekspresja zmutowanego nabłonka pseudohypoaldosteronizmu typu I na kanale Na + pozbawionym regionu tworzącego pory jego podjednostka ad 6”

Komórki T odpowiadające na GAD65 są aktywowane u pacjentów z cukrzycą autoimmunizacyjną typu 1a ad 7

Dodanie anty-CD28 w hodowlach stymulowanych TT nie hamowało odpowiedzi proliferacyjnej lub wydzielania cytokiny do antygenu, co sugeruje, że reaktywacja komórek T pamięci nie zależy od costimulation CD28. U pacjentów z cukrzycą typu odpowiedź na GAD65 ma cechy podobne do odpowiedzi na TT. Badania wykazały, że CTLA-4 ma ujemną funkcję regulatorową w aktywacji komórek T. CTLA-4 wiąże się z cząsteczkami B7 z większym powinowactwem niż CD28. Wykazano, że rozpuszczalne mAb anty-CTLA-4, jak również jego fragmenty F (ab .), zwiększają proliferację limfocytów T w odpowiedziach mieszanych limfocytów myszy (37), podczas gdy blokowanie oddziaływania CTLA-4 / B7 prowadzi do wzmocnienie aktywacji limfocytów T. Read more „Komórki T odpowiadające na GAD65 są aktywowane u pacjentów z cukrzycą autoimmunizacyjną typu 1a ad 7”

Poczynając od matki i matki przekazywać stymulujące białko G podjednostka nokautów wywołuje przeciwny wpływ na metabolizm energetyczny ad 8

Kilka receptorów sprzężonych z białkiem G (np. Melanokortyna 4, hormon koncentrujący melaninę i receptory serotoniny 2c już zaangażowano w regulację homeostazy energii. Przerwanie alternatywnych produktów Gnas może również odgrywać rolę w rozregulowaniu metabolizmu energetycznego. NESP55 jest specyficznym dla matki produktem genowym Gnas, eksprymowanym głównie w rdzeniu nadnerczy i mózgu (16, 17). Jednakże, NESP55 prawdopodobnie nie odgrywa roli w fenotypie m / / +, ponieważ insercja eksonu 2 nie zakłóca regionu kodującego NESP55, a wstępne wyniki sugerują, że ekspresja mRNA NESP55 w nerkach jest nienaruszona u myszy m / / (S Yu i LS Weinstein, niepublikowane dane). Read more „Poczynając od matki i matki przekazywać stymulujące białko G podjednostka nokautów wywołuje przeciwny wpływ na metabolizm energetyczny ad 8”

Nowa rola inhibitora kinazy zależnej od cykliny p27Kip1 w stymulowanym przez angiotensynę IIp rozkurczu komórek mięśni gładkich naczyń ad 7

Następnie testowaliśmy rolę p27Kip1 w pośredniczeniu w hipertrofii komórkowej, stosując podejście zysku / funkcji / utraty funkcji. Nadekspresja p27Kip1 umożliwiła konwersję odpowiedzi VSMC na stymulację surowicy z hiperplazji na hipertrofię. Odwrotnie, leczenie antysensownym ODN p27Kip1 powodowało progresję cyklu komórkowego w VSMCs pozbawionych surowicy w sposób specyficzny dla sekwencji. Ponadto, w obecności antysensownego ODN p27Kip1, ale nie kontrolującego ODN, Ang II zwiększał przerost komórkowy, co sugeruje, że odpowiedź VSMC na Ang II jest regulowana przez poziom białka / aktywności p27Kip1. Wyniki tego badania sugerują, że inhibitor Cdk p27Kip1 odgrywa kluczową rolę w określaniu fazy G1 w kierunku przerostu komórkowego lub hiperplazji. Read more „Nowa rola inhibitora kinazy zależnej od cykliny p27Kip1 w stymulowanym przez angiotensynę IIp rozkurczu komórek mięśni gładkich naczyń ad 7”

Metylowana selekcja in vivo i chemoprotekcja alogenicznych komórek macierzystych w modelu zwierzęcym ad 8

Pragniemy podziękować Rainerowi Storbowi, Marie-Terese Little, Stacy Zellmer i Serinie Gisburne za typowanie DLA, Brenda Sandmaier i Peterowi Moore za dostarczanie przeciwciał specyficznych dla psów do analiz podzbiorów, Amgen Inc. za dostarczanie specyficznych dla psa czynników wzrostu, oraz techników laboratoriów hematologicznych i patologicznych Centrum Badań nad Rakiem Freda Hutchinsona. Chcielibyśmy podziękować A. Dusty Miller za wykonanie testów wirusów pomocniczych i Kerstin Schwarzwaelder za pomoc w analizie LAM-PCR. Dziękujemy Christopherowi Baumowi za dostarczenie promotora SFFV. Read more „Metylowana selekcja in vivo i chemoprotekcja alogenicznych komórek macierzystych w modelu zwierzęcym ad 8”

Strategie terapeutyczne klinicznego blokowania sygnalizacji IL-6 / gp130 ad 7

Te wyniki sugerują, że podczas przewlekłego postępu choroby transkryptaż IL-6 głównie napędza prozapalne działania IL-6. Jednakże ważne jest, aby zauważyć, że IL-6 reguluje również pewne odpowiedzi przeciwzapalne, w tym rozdzielczość wrodzonych odpowiedzi immunologicznych i kontrolę regulatorów cytokin, takich jak rozpuszczalny receptor TNF p55 i antagonista receptora IL-1 (71, 119). ). Regulacja tych czynności może mieć ważne implikacje w kontrolowaniu obrony przeciwdrobnoustrojowej gospodarza i związanej z zapaleniem odporności na nowotwór (31, 71, 102). Wyzwaniem będzie ustalenie, czy sgp130Fc oferuje prawdziwą kliniczną przewagę nad bardziej standardowymi terapiami mAb przeciw IL-6 lub IL-6R. Read more „Strategie terapeutyczne klinicznego blokowania sygnalizacji IL-6 / gp130 ad 7”

Grupa podobna do rodnika hydroksylowego utlenia białka ściany tętnicy małpy cynomolgus we wczesnej cukrzycowej chorobie naczyniowej ad 6

Aby określić, czy hiperglikemia sprzyja utlenianiu białka in vivo, ocenialiśmy związek między kontrolą glikemii (mierzoną jako hemoglobina glikowana w surowicy) a poziomem produktów utleniania aminokwasów w tkance aortalnej, porównując kontrolne i leczone STZ małpy cynomolgus (Figura 4). Analiza regresji liniowej wykazała silną korelację między poziomami hemoglobiny glikowanej i poziomami zarówno orto-tyrozyny, jak i meta-tyrozyny (r2 = 0,9 i 0,8 odpowiednio, oba P <0,001). Istniała granica istotnej korelacji z poziomami o, o-dityrozyny (r2 = 0,3; P = 0,07). W przeciwieństwie do tego, nie było korelacji między poziomami hemoglobiny glikowanej a poziomem 3-nitrotyrozyny. Te obserwacje potwierdzają hipotezę, że hiperglikemia sprzyja tworzeniu orto-tyrozyny i meta-tyrozyny w ścianie tętnic i sugeruje, że zarówno glukoza, jak i inne szlaki przyczyniają się do tworzenia o, o-dityrozyny. Read more „Grupa podobna do rodnika hydroksylowego utlenia białka ściany tętnicy małpy cynomolgus we wczesnej cukrzycowej chorobie naczyniowej ad 6”

Kluczowa rola tiolowych przeciwutleniaczy w utracie masy niedoboru estrogenu ad 7

Stwierdziliśmy, że NAC i askorbinian, które zwiększają stężenie glutationu w tkankach (16, 26), zapobiegają utracie kości u myszy z wyciętymi jajnikami. Odwrotnie, BSO, podobnie jak wycięcie jajników, obniżyło tiolowe przeciwutleniacze i spowodowało ubytek kości. Rzeczywiście, podawanie BSO zapewnia fenokopię utraty masy kostnej z niedoborem estrogenu: oba łączą wzrost resorpcji z hiperplastyczną reakcją osteoblastyczną z hiperodsopcją, która jest niewystarczająca do zastąpienia utraconej kości. Ponadto poziomy glutationu były porównywalne po podaniu jajników i BSO. Sugeruje to, że stopień, w jakim wycięcie jajników obniżało poziom glutationu, był wystarczający, aby uwzględnić ubytek masy kostnej spowodowany niedoborem estrogenu. Read more „Kluczowa rola tiolowych przeciwutleniaczy w utracie masy niedoboru estrogenu ad 7”

Podawanie in vivo lentiwirusowej szczepionki jest ukierunkowane na DC i indukuje skuteczne odpowiedzi limfocytów T CD8 + ad 7

Istnieją jednak dowody na to, że szczepienie przeciwnowotworowe może indukować specyficzne odpowiedzi przeciwnowotworowe limfocytów T, a nawet regresję nowotworu. W przytłaczającej większości przypadków regresje te były jedynie przejściowe, co sugeruje, że indukowane odpowiedzi komórek T mogą nie być wystarczająco silne i wystarczające (32). Na podstawie tych obserwacji istnieje możliwość, że zoptymalizowany protokół szczepienia może prowadzić do silniejszych i leczących odpowiedzi przeciwnowotworowych limfocytów T. W tym celu ocenialiśmy wektor lentiwirusowy jako nową kandydującą szczepionkę przeciwko komórkom T. Lentiwent trzeciej generacji został wybrany ze względu na jego zaawansowany profil bezpieczeństwa, umożliwiający jego podawanie in vivo oraz z powodu przypuszczalnej nieobecności wcześniej istniejącej odporności przeciwwstrząsowej u ludzi. Read more „Podawanie in vivo lentiwirusowej szczepionki jest ukierunkowane na DC i indukuje skuteczne odpowiedzi limfocytów T CD8 + ad 7”

Utrata alleli leży u podstaw segmentowej choroby Haileya-Haileya, zapewniając molekularne potwierdzenie nowej koncepcji genetycznej ad 6

Po przepłukaniu 70% etanolem, pocięto je na kawałki i inkubowano przez noc w 4 ° C w 2 uncji / ml roztworu dyspazy (GIBCO BRL, Invitrogen Corp.). W drugim etapie inkubowano je w 37 ° C przez 2 dodatkowe godziny. Następnie naskórek został usunięty ze skóry właściwej i inkubowany przez 30 minut w temperaturze 37 ° C w 5 ml trypsyny / EDTA (PAA Laboratories GmbH). Po zatrzymaniu trawienia enzymatycznego przez dodanie 5 ml roztworu neutralizującego trypsynę (TNS, PAA Laboratories GmbH), zawiesinę komórek odwirowano przez 10 minut przy 250 g, a osad komórkowy ponownie zawieszono w suplementowanej pożywce wzrostowej keratynocytu (KGM; Clonetics). . Read more „Utrata alleli leży u podstaw segmentowej choroby Haileya-Haileya, zapewniając molekularne potwierdzenie nowej koncepcji genetycznej ad 6”